Implication de la proline racemase dans la biologie de Trypanosoma vivax

Résumé du livre

Trypanosoma vivax est l’un des principaux parasites responsables de la Trypanosomose Animale Africaine. Malgré son impact considérable, il est très peu étudié et on déplore l’absence d’outil permettant la recherche sur ce parasite, comme un modèle murin robuste ou des conditions permettant sa culture in vitro et sa transgénèse. Nous avons identifié chez T. vivax, la présence d’une proline racémase (PRAC), homologue de la TcPRAC, un mitogène et un facteur de virulence de T. cruzi découvert et caractérisé au laboratoire. Nous avons donc développé tous les outils pour déterminer le rôle de cette protéine chez T. vivax. Nous avons établit un modèle murin d’infection à T. vivax présentant les caractéristiques majeures des bovins affectés: une anémie sévère, des lésions macroscopiques au niveau du foie et de la rate ainsi que des œdèmes au cerveau, le tout aboutissant à la mort de l’animal. Nous avons mis au point la culture axénique de ce parasite sous sa forme épimastigote, construits des vecteurs spécifiques de T. vivax et définis des conditions de transfection permettant l’obtention des premiers transfectants de T. vivax génétiquement modifiés de façon stable. La création d’une souche exprimant la luciférase nous a permis de consolider le fait que T. vivax est capable de franchir la barrière hémato-encéphalique durant la phase tardive de l’infection. Enfin, nous avons inactivé les gènes TvPRAC par recombinaison homologue (∆TvPRAC) et avons pu montrer que la TvPRAC est impliquée chez tous les stades évolutifs de T. vivax et peut être définie comme facteur de virulence parasitaire, la moitié des souris infectées avec la souche ∆TvPRAC étant capable de contrôler l’infection